考博試題與復習策略剖析:分子生物學和基因工程

考博試題與復習策略剖析:分子生物學和基因工程

根據我的分析，各地各院校的《分子生物學》和《基因工程》考博試題大體由以下四部分組成：

①基礎概念與理論

②技術思路與實驗方法

③熱點與前沿問題

④與專業方向或所報院校研究領域緊密相關的內容

其中以①、②比重較大，而③、④比重較小，且各地各年度變化較大。

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對“①基礎概念與理論”的復習，需要以一本碩士生用的《分子生物學》和《基因工程》課本為主，扎扎實實去摳、去啃，但也不要以為用一種課本就能應付考試。須知不同課本存在有無、詳略等差異，要適當補充和參考其它同類課本和專著內容。

復習“基礎概念”要注意英文術語和中文術語對應起來，還要注意注重相似或相近名詞的辯析。比如：如限制性內切酶、增強子、轉座子、cDNA、cDNA文庫、基因組文庫、Ti質粒、T-DNA、有義鏈、Pribnow盒、反式作用因子、順式作用元件、拼接體、α互補、鋅指結構、鋅指蛋白、分子伴侶、酵母雙雜交、基因打靶、RNA編輯、基因芯片、RNAi、Western blotting、RT-PCR、Kozak sequence、SD sequence、CpG island、CTD of RNA Pol II、SiRNA、attenuator、oncogene、gene knock-out、molecular hybridization、human genome project、Restriction fragment length polymorphism，及終止密碼子和終止子、Poly A 和Poly A signal、Operon 和Operater、cis調控和trans調控、琥珀突變和琥珀校正等。

“基礎理論”部分有些是要求回答原理或機制的，有的則要求結合例子論述的，有些是宏觀（全局）問題，有些則為微觀（細節）問題。因此在復習“基礎理論”時，宏觀和微觀、原理和實例都要照顧到，并在復習和答題時加以注意。

要求回答原理或機制的類型題如：

1、質粒的不相容性和相容性的分子基礎機制 。

2、G蛋白的結構特點信其功能

3、核酸電泳常用的染色劑及作用機理。

4、列出真核基因5′上游激活基因轉錄的元件并詳細介紹

5、SD序列和Kozak序列分別予以介紹

6、試述核型intron拼接中spliceosome的形成及拼接簡單機制

7、apoptosis的特征與其生理及病理意義

8、簡述轉錄因子Leucine Zipper Protein的結構和功能

9、從分子水平上解釋多抗、單抗的產生？怎樣理解產生抗體的多樣性？

10、聚丙烯酰胺凝膠電泳與瓊脂糖電泳在DNA電泳中有何不同和特點。

11、Sanger原理雙脫氧法測序的基本原理是什么？

12、Southern印跡的基本原理及其應用。

13、試述兩種轉基因方法并說明其原理。

14、試述雙元載體的概念及其構件原理。

15、試述AFLP的原理及其應用。

16、試述Phagmid和cosmid作為載體的特點。

17、試述σ因子和ρ因子在轉錄過程中的作用。

18、試述16srRNA的分子大小、結構特點和生物學作用。

19、何謂雙元載體，簡述其組裝過程及其作用機理？

20、基因組DNA有時會產生G：T錯配，DNA復制時有時會發生A：C錯配，他們產生的原因是什么，各怎么修復？

21、大腸桿菌的啟動子（或操縱子）活性有無強弱之分，如果有，決定其強弱的因素什么？

22、有哪些第二信使，其來源以及在轉錄種的作用。

23、什么是基因印記（imprinting），它是怎么遺傳的？舉例說明。

24、為什么說“ribosome is a ribozyme”? （

25、試述Z-DNA和回文序列的結構特點和功能的。

26、轉錄過程中進行起始定位的因子是什么？該因子在轉錄全過程是否都存在？為什么？現已經體外科隆并純化該蛋白，它能否單獨與DNA結合？為什么？

27、什么是“epigenetic mutation”？如何導致的？

28、為什么核酸和蛋白都是有方向的?

29、試述信號轉導的cAMP通路 。

30、什么是內切酶的星號活性 ？

31、可以磷酸化的氨基酸是哪三個？

32、帶苯環的氨基酸是哪三個？

33、DNA在多少nm有最大的光吸收，為什么?

34、轉座子標簽法克隆植物基因的原理。

35、在DNA復制過程中會形成一種復制體（replisome）的結構，它是由哪幾部分組成的？

36、AP-PCR和普通PCR的區別。

37、RNAi（RNA干涉）的作用機理和應用。

38、試述基因芯片的種類和工作原理。

39、敘述功能基因組學的內容與意義。

40、試述植物基因組和動物基因組結構有何區別。

41、試述RNA的自我剪切有幾種方法其過程。

42、試述如何評價轉基因安全性。

43、簡述真核生物基因表達的主要調控環節和蛋白質合成后靶向運送的類型

44、試述真核生物與原核生物轉錄的區別。

45、試述生物膜有那些主要的生物功能清舉例說明膜蛋白參與那些重要的生命過程。

46、酶調控是代謝調控的實質，為什么? 試述酶水平調節層次。

47、DNA片段可能含編碼多肽鏈的前幾個密碼子：

5′—CGGAGGATCAGTCGATGTCCTGTGTG—3′

3′—GCCTCCTAGTCAGCTACAGGACACAC—5′

1) 哪一條鏈可能為模板鏈？

2) mRNA的順序？

3) 編碼的mRNA能形成二級結構么？

4) 翻譯從哪里開始，哪個方向進行？

5) 這條DNA片段最可能從原核還是真核細胞中分離出來的？

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有些則要求結合例子論述的，這類型題如：

1、以乳酸操縱子為例說明基因表達與阻遏。

2、基因工程基本過程，結合專業舉一個實例并說明意義。

3、腫瘤病毒致病的機制，試舉例說明。

4、以擬南芥或玉米為例，說明轉座子標簽法進行基因轉移的原理。

5、動物基因與植物基因有哪些異同點，并結合實例加以說明？

6、真核生物轉座子有哪些類型，結合實例說明其在生物進化中的生物學意義？

7、試結合實例闡明基因沉默的主要原因。

8、生物大分子之間的相互作用是生命現象的具體表現，試以蛋白質之間以及蛋白質與核酸分子之間的相互作用為例加以說明。

9、何謂蛋白質的磷酸化和脫磷酸化，試以實例說明其對生長和發育的調節的作用
10、什么是選擇性剪接？舉例說明其在發育調控方面的意義。

11、如何提高轉基因的表達水平？試舉例說明。

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在復習“②技術思路與實驗方法”，學生必須熟悉教材上所舉的經典實驗例子，也要復習常用的分子生物學實驗方法及其應用，如可閱讀《分子克隆實驗指南》、《現代分子生物學實驗手冊》等，另外平時多讀期刊論文，并注意其實驗方法和思路。雖然理論考試不會考你實驗細節，但研究思路和實驗設計卻是常常考的問題。例如：

1、研究DNA與蛋白質相互作用的方法有幾種。

2、如何提高外源基因片段在原核細胞中的表達量？

3、已知某基因與某蛋白能夠相互作用，設計實驗證明并找出作用位點。

4、已知某蛋白存在翻譯后磷酸化修飾，設計實驗證明并找出磷酸化位點。

5、給定一個cDNA序列，如何表達，純化到蛋白質？

6、手中有一個EST序列，怎樣找到與之匹配的基因，并研究其功能？列舉3種方法。

7、給定一個組織，簡述如何構建cDNA文庫。

8、簡述基因敲除小鼠模型的策略。

9、克隆了一個新基因，設計實驗證明該基因內含4個intron 。

10、用實驗證明原核生物和真核生物基因結構的差別。

11、如何用實驗證明了核酸是遺傳物質？
12、試述轉座子標簽法克隆目基因。

13、試述定位克隆技術。

14、目前已克隆轉錄因子有那些，采用什么方法克??？

15、用于植物動物的基因轉移方法有何區別？

16、獲得某一基因，如何得知其功能？

17、什么是宏基因組？基本研究路線策略如何？

18、基因a序列已知（其上游序列亦已知），在它上游（-370bp）存在-ggtcat-的調控元件，證明該調控元件中每個堿基在調控中貢獻可能不同。

20、用微球菌核酸酶酶解染色質，然后進行電泳，發現200 bp、400 bp、600 bp、800 bp……的條帶，試問從該現象可以得出什么結論？

21、在古細菌和動物細胞中各有一種蛋白質，已知它們的cDNA 3′端序列，設計試驗分別找出其5′端序列。

22、已知某質粒中克隆了一段序列（s-d），這段序列兩端為兩個不同的酶切位點（同尾酶s、d位點），序列附近的質粒序列中有另外一個酶切位點，請設計試驗，克隆出四個首尾相連的s-d序列的質粒

23、怎樣將動物基因轉入到植物體中，寫出具體步驟，并結合實例說明提高動物基因在植物體中高效表達的策略？

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在復習“③熱點與前沿問題”部分時，要注重平時對分子生物學期刊的瀏覽，了解最新的進展和熱點，比如當下較熱的有基因組學、蛋白組學、轉錄組學、表觀遺傳學、染色質水平調控、微RNA、小RNA等。

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在復習“④與專業方向或所報院校研究領域緊密相關的內容”時，要注意你所考的專業方向或所報院校研究領域。這里不再贅述。

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另外，注意考試題型，如果除名詞解釋、簡答題、論述題外，還有埴空題、判斷題目，則需要看書更加仔細，不漏過任何一個重要的細節，如：

1、II型核酸內切酶的產物是？①5′粘末端②3′粘末端③平末端④以上都有

2、T4-DNA連接酶連接的最適溫度是？

3、純化或抽提DNA時，DNA存在于哪一相中？

4、瓊脂糖凝膠電泳中DNA被降解的特征有那些？