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湖南師范大學碩士研究生入學考試復試題考試大綱 復試筆試科目 考試科目:基因工程 一、考試形式與試卷結構 1) 考試時間 考試時間為 180 分鐘。 2) 答題方式 答題方式為閉卷、筆試。 3) 試卷內容結構 基因工程 (90%) 心臟發育的基因調控 (10%) 4) 題型結構 名詞解釋 10 個 (30%) 填空題 20 個 (20%) 簡答題 5 個 (50%) 二、考試內容與考試要求 (一)基因工程部分 第一章 基因工程概述 基因工程的基本概念,基因工程的基本流程,基因工程誕生的標 志,基因工程有哪些主要應用? 第二章 基因工程的工具酶和載體 1.基因工程的工具酶 基因工程的工具酶有哪些?限制性內切核酸酶的特點與使用注意 事項,DNA 聚合酶和 Klenow 大片段的作用,DNA 連接酶的作用, 堿 性磷酸酶的作用及用途,末端脫氧核苷酸轉移酶的用途和作用等。 2. 基因工程的載體 基因工程載體必須滿足的基本條件,質粒載體的主要特征與基本 結構,噬菌體載體有哪些類型,克隆載體有哪些類型?攜帶能力有多 大?人工微小染色體的概念,標記基因的種類。什么是α 互補?表達 載體的概念與基本結構,T7 噬菌體啟動子系統的組成、融合蛋白表 達系統的概念與載體結構,真核表達系統的載體組成,真核表達載體 高效表達的實現條件,各種載體的結構特征與各結構的作用等。 第三章 目的基因的制備與鑒定 1.基因文庫 基因組文庫的概念,基因組文庫的構建方法, cDNA 文庫的概念 和構建流程,構建 cDNA 文庫需要用到哪些工具酶,合成 cDNA 第二條 鏈有哪些方法等。 2.PCR 技術 PCR 技術的基本原理,PCR 反應體系的主要成分,PCR 反應主要程 序,提高 PCR 反應特異性的措施。逆轉錄 PCR、巢式 PCR、反向 PCR、 多重 PCR 及熒光定量 PCR 的概念和應用。 3.蛋白質工程 基因組數據庫的概念,蛋白質工程的概念,PCR 介導定點突變的 原理。 4. 目的基因重組子的鑒定 核酸分子雜交的概念,探針的類型與標記方法。Southern 雜交、 Northern 雜交、Western 雜交及菌落(嗜菌斑)原位雜交的基本原理 以 及 它 們 之 間 的 相 同 點 與 不 同 點 。 末端終止法 DNA 測序的基本原理,化學降解法測序的基本原理,DNA 自動測序的基本原理等等。 第四章 基因工程在基因功能研究中的應用 1.基因表達譜的研究 胚胎原位雜交的概念,胚胎抗體染色的概念,基因芯片的概念與 類型,基因芯片的流程與應用。 2. 基因突變與基因敲除 轉座子誘變的原理與優點,基因敲除的概念與流程,條件基因敲 除的原理與優點,RNA 干擾的概念與分子機制,RNA 干擾的優點與應 用。基因過表達系統的組成,UAS-GAL4 系統的組成與優點。 3.基因的相互作用研究 凝膠遷移阻滯實驗的原理與應用,酵母雙雜交系統的原理與組成、 酵母雙雜交系統的應用,免疫共沉淀的原理等。 第五章 轉基因植物 1.轉基因植物的制備 植物轉基因的受體系統的類型,外源基因導入植物的方法, Ti 質粒的結構特點, Ti 質粒介導植物基因轉移的過程。植物轉基因載 體的報告基因,提高外源基因在植物體內表達水平的策略。 2.轉基因植物的現狀 抗蟲轉基因植物的概念,抗除草劑轉基因作物的概念。植物生物 反應器的概念。轉基因生物的安全性和主要影響因素等。 第六章 轉基因動物 轉基因動物的概念,顯微注射法制備轉基因動物的主要過程。逆 轉錄病毒法制備轉基因動物的主要過程。胚胎干細胞的概念。胚胎干 細胞制備轉基因動物的流程。體細胞核移植法及其制備轉基因動物的 主要流程。動物器官生物反應器的概念。轉基因動物的應用。轉基因 動物在醫藥科學研究中的應用。轉基因小鼠的鑒定方法。 第七章 基因治療 基因治療的概念,基因治療的基本策略,基因治療的載體類型。 體外基因治療與體內基因治療的比較。單基因遺傳病的基因治療策 略,腫瘤基因治療的策略,耐藥基因治療的概念,自殺基因治療的概 念等。艾滋病基因治療的策略等。 第八章 基因工程藥物 基因工程藥物、基因工程抗體、基因工程疫苗的概念,基因工程 藥物的優點,基因工程藥物的發展概況等。 (二)心臟發育的基因調控部分 心臟發育有哪些基因控制?如何鑒定某個基因與心臟疾病相關? 心臟發育與基因控制的關系是什么?心臟發育基因調控研究的進展 如何? 三、參考書目 1. 袁婺洲主編,基因工程。北京,化學工業出版。2010 年。 2. 吳秀山,袁婺洲等。心臟發育概論??茖W出版社。2006 年
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