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1 湖南師范大學碩士研究生入學考試自命題考試大綱 考試科目代碼:[ ] 考試科目名稱:[蛋白質化學與蛋白質組學] 一、考試形式與試卷結構 1) 試卷成績及考試時間: 本試卷滿分為 100 分;考試時間為 180 分鐘。 2)答題方式: 閉卷、筆試 3)試卷內容結構 (一)基礎部分 約 70% (二)綜合部分 約 30% 4)題型結構 (一)名稱解釋題,5 小題,每小題 2 分,共 10 分 (二)判斷題,10 小題, 每小題 1 分,共 10 分 (三)填空題,20 空,每空 1 分,共 20 分 (四)簡答題,6 題,共 60 分 二、考試內容與考試要求 (一)考試內容 1、氨基酸的種類、性質與結構,蛋白質的結構及結構與功能的關系,蛋白質的性質。 緩沖溶液的制備,蛋白質定量,SDS-凝膠電泳,蛋白質沉淀與濃縮,蛋白質印跡。 2、蛋白質純化方法,柱層析技術,凝膠過濾層析、制備型凝膠電泳、硫酸銨沉淀、離 子交換層析、等點聚焦色譜、羥基磷灰石色譜、疏水層析、親和色譜的原理與技術。 3、氨基酸組成分析、氨基酸序列分析、蛋白質的分子量、蛋白質二級結構和三級結構 確定。 4、固相多肽化學合成的原理,多肽合成樹脂,氨基酸的去保護作用、合成肽的偶聯、裂 2 解作用。 5、膜蛋白的溶解作用,去垢劑。 6、蛋白質組學的概念,樣品制備,雙向凝膠電泳,多肽與蛋白質的質譜分析。 (二)考試要求 1、氨基酸與蛋白質 (1)掌握 20 種標準氨基酸的名稱、符號、結構及主要性質。 (2)掌握蛋白質一、二、三、四級結構的相關概念、特點。 (3)熟練掌握蛋白質的主要性質。 (4)熟悉緩沖溶液的制備方法,熟練掌握蛋白質定量的方法與技術。 (5)了解蛋白質的蛋白質沉淀與濃縮,掌握蛋白質印跡技術。 2、蛋白質的分離純化 (1)了解亞細胞分級分離的基本方法和原理; (2)掌握蛋白質分離純化的基本步驟和注意事項。 (3)了解柱層析的基本原理,熟練掌握采用凝膠過濾層析、制備型凝膠電泳、硫酸銨 沉淀、離子交換層析、等點聚焦色譜、羥基磷灰石色譜、疏水層析、親和層析色譜分離蛋白 質的基本原理與技術。 3、蛋白質的鑒定方法與技術 (1)了解蛋白質組成分析的方法,熟悉蛋白質氨基酸序列測定的一般方法、基本過程 和特點,掌握 Edman 序列測定、羧基端序列測定和質譜從頭測序技術。 (2)熟練掌握蛋白質分子量確定的要點。 (3)掌握確定蛋白質二級結構和三級結構的方法與技術。 4、多肽化學合成 (1)了解氨基酸中羧基的活化方法,偶聯試劑的種類,肽鍵的形成方法。 (2)熟悉固相多肽合成樹脂的種類、氨基酸的去保護作用、合成肽的偶聯、裂解作用, 掌握固相多肽合成的基本步驟和影響多肽合成效率的因素。 3 5、膜蛋白質 (1)了解蛋白質純化的基本概念及相關知識。 (2)熟悉去垢劑的主要類型及其特點,去垢劑的處理方法。 (3)了解溶解作用的標準,熟悉溶解膜蛋白質的物理參數。 6、蛋白質組學 (1)了解蛋白質組學的概念、研究過程和基本特點。 (2)熟悉蛋白質樣品的制備方法。 (3)掌握雙向電泳等蛋白質組學的分離技術及主要相關知識點。 (4)了解生物質譜分析的基本知識,掌握 MALDI 質譜分析的樣品制備,熟悉 ESI 質譜 和 MALDI 質譜鑒定的基本原理和主要相關知識點。 三、參考書目 1.Hubert Rehm. 《 Protein Biochemistry and Proteomics 》 Elsevier Acadeamic Press.2006. 2.Milklos Bodanszky. Pepetide Chemistry.(Second Revised Edition) Springer-Verlag.2005 3.王鏡巖等主編,《生物化學》上、下冊(第三版),高等教育出版社,2002年。
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