2021年湖南師范大學碩士研究生入學考試自命題科目考試大綱

考試科目代碼：復試筆試科目         考試科目名稱： 基因工程

一、考試內容及要點

第一章  基因工程概述                                                               

基因工程的基本概念，基因工程的基本流程，基因工程誕生的標志，基因工程有哪些主要應用？

第二章  基因工程的工具酶                                                                     

基因工程的工具酶有哪些？限制性內切核酸酶的特點，同尾酶與同裂酶的概念，DNA聚合酶和Klenow大片段的作用，DNA連接酶的作用， 堿性磷酸酶的作用及用途，末端脫氧核苷酸轉移酶的作用,一步克隆法的原理等。

第三章  基因工程的載體

基因工程載體的概念及必須滿足的基本條件，質粒載體的主要特征與基本結構，λ噬菌體載體的攜帶能力，COS位點的作用，克隆載體的概念，人工微小染色體的概念，質粒載體的標記基因的種類。什么是α互補？表達載體的概念與基本結構，T7噬菌體啟動子系統的組成、融合蛋白表達系統的概念與載體結構，真核表達系統的載體組成等。

第四章 目的基因的獲取與制備                                                                  

1.基因文庫

基因組文庫的概念，基因組文庫的構建方法， cDNA文庫的概念和構建流程，構建cDNA文庫需要用到哪些工具酶，合成cDNA第二條鏈有哪些方法，基因文庫的載體類型等。

2.PCR技術

PCR技術的基本原理，PCR反應體系的主要成分，PCR反應主要程序。逆轉錄PCR、反向PCR、多重PCR及熒光定量PCR的概念與原理，Ct值的概念。

3.蛋白質工程

蛋白質工程的概念，PCR介導定點突變的原理。

第五章 目的基因轉入受體細胞的方法

目的基因轉入大腸桿菌細胞的方法，感受態細胞的概念。目的基因轉入植物細胞的方法，花粉管誘導法的概念，基因槍法的概念，Ti質粒的結構，T-DNA的作用，雙元載體的組成，Ti質粒介導外源基因導入植物細胞的機制。顯微注射法的概念，逆轉錄病毒介導法的概念，精子載體法，體細胞克隆法的概念。

第六章 目的基因重組子的鑒定

核酸分子雜交的概念，探針的類型與標記方法。Southern雜交、Northern雜交、Western雜交及菌落（嗜菌斑）原位雜交的基本原理以及三者之間的比較。末端終止法DNA測序的基本原理， DNA自動測序的基本原理,二代DNA測序的類型，焦磷酸測序的原理，Solexa測序的原理，單細胞測序的原理。

第七章 基因工程在基因功能研究中的應用                                            

1.基因表達譜的研究

胚胎原位雜交的概念，基因芯片的概念與類型，基因芯片的流程與應用。

2. 基因突變與基因敲除

轉座子誘變的原理與優點，基因敲除的概念與流程，條件基因敲除的原理與優點，Cre酶的作用方式，LoxP序列的作用，RNA干擾的概念與分子機制，RNA干擾的優點與應用。TALEN打靶技術的原理和優點，DNA斷裂修復的類型，CRISPR的概念，CRISPR基因編輯的原理，CRISPR基因編輯的應用。

3.基因的相互作用研究

凝膠遷移阻滯實驗的原理與應用，染色質免疫沉淀的原理與應用，酵母雙雜交系統的原理與應用，免疫共沉淀的原理等。

第八章 轉基因植物                                                                             

1.轉基因植物的制備

外源基因導入植物的方法， Ti質粒的結構特點， Ti質粒介導植物基因轉移的過程。

2.轉基因植物的現狀

抗蟲轉基因植物的概念，抗除草劑轉基因作物的概念。植物生物反應器的概念。轉基因生物的安全性和主要影響因素等。

第九章 轉基因動物                                        

轉基因動物的概念，顯微注射法制備轉基因動物的主要過程。逆轉錄病毒法制備轉基因動物的主要過程。胚胎干細胞的概念。胚胎干細胞制備轉基因動物的流程。體細胞核移植法及其制備轉基因動物的主要流程。動物器官生物反應器的概念。轉基因小鼠的鑒定方法。

第十章 基因治療                                                                                

 　基因治療的概念，基因治療的基本策略，基因治療的載體類型。單基因遺傳病的基因治療策略，腫瘤基因治療的策略，耐藥基因治療的概念，自殺基因治療的概念等。CAR-T的概念與優點。艾滋病基因治療的策略等。

二、參考書目

1.   袁婺洲編著，《基因工程》，第二版。北京化學工業出版社，2019年。

2.   袁婺洲主編，《基因工程》。北京，化學工業出版。2010年。

3.   《基因工程》在線開放課程，袁婺洲、萬永奇、范雄偉主講，中國大學MOOC，愛課程網。

4.   《轉基因的科學--基因工程》在線開放課程，袁婺洲、萬永奇、范雄偉主講，知到APP，智慧樹網。